TRF技术（时间分辨荧光技术)
产品名称： TRF技术（时间分辨荧光技术)
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珀金埃尔默企业管理（上海）有限公司
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TRF技术利用了镧系元素螯合物所发出的荧光衰减时间很长的特点，其灵敏度高，动态范围广。下表列出了镧系元素铕的螯合物和常用的荧光素之间的比较。
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铕螯合物（Eu-chelate） |
荧光素 |
|
激发光峰值(nm) |
340 |
490 |
|
发射光峰值(nm) |
613 |
515 |
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Strokes’ shift (nm) |
273 |
25 |
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衰减时间(ns) |
730000 |
3 |
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发射光波长宽度 |
窄 |
宽 |
|
背景干扰 |
低 |
高 |
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自淬灭 |
无 |
强 |
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重复测量次数 |
高 |
低 |
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多标记应用 |
好 |
有限 |
从上表中可以看出TRF技术的几大特点：
l
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镧系元素的宽Stroke’ s shift |
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镧系螯合物激发后的衰减曲线 |
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普通荧光激发后的衰减曲线 |
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检测的时间窗口 |
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镧系元素的超长衰减时间 |
l 发射光持续时间长，最高可达传统荧光素的数万倍，从而可以延迟检测，扣除背景荧光。
l 高灵敏度，因为扣除了背景荧光，所以可以得到比常规荧光高得多的灵敏度。
l 多重标记，镧系元素中的铕，铽，镝和钐的发射光波长差异明显，最大可以进行四重标记。
根据时间分辨荧光的原理衍生出的相关技术，包括DELFIA、LANCE和TruPoint等。