DNA提取
产品名称: DNA提取
英文名称: DNA extraction
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更新时间: 2023-09-21T16:12:31
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DNA是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,因此DNA的提取也是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作之一。我公司提供从各种不同来源的样品(如细菌、真菌、血液、培养细胞、动物组织及植物组织等)中提取高纯度基因组DNA的服务。
基本步骤:
1、样品预处理
因细胞结构及所含成分不同,样品预处理的方法也有差异。不同样品的预处理方法大致如下:
● 植物组织——液氮研磨
● 动物组织——匀浆、液氮研磨
● 培养细胞——蛋白酶K消化
● 细 菌——溶菌酶消化
● 酵 母——Lyticase消化、玻璃珠破碎
注意:客户最好提供新鲜的样品或取样后立即在低温(-20℃或-70℃)冷冻保存的样品,避免反复冻溶。
2、细胞裂解
● CTAB法
CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵)是一种阳离子去污剂,可融解细胞膜,并与核酸形成符合物。该复合物在高盐溶液中(>0.7M NaCl)是可溶的,通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。此法多用于植物组织、真菌等材料。
● SDS法
SDS是一种阴离子去污剂,高温(55℃-65℃)下可裂解细胞,使蛋白变性、染色体解析。常用于血液、细菌、酵母、动物组织、细胞等样品基因组DNA的提取。
● 其他方法
物理方法如机械剪切、超声波破碎、匀浆等,化学方法如异硫氰酸胍、碱裂解、蛋白酶K消化等。
3、DNA分离纯化
● 用酚/氯仿抽提裂解液,收集水相,乙醇沉淀DNA,最后用TE溶解DNA沉淀。
4、DNA的定量及检测
● 琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段的分子质量。
● 紫外分光光度计检测DNA浓度
DNA在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50ug/ml双链DNA。
提取的基因组DNA样品浓度=OD260×50ug/ml×稀释倍数
● 紫外分光光度计检测DNA纯度
一般用OD260/OD280值检测DNA样品的纯度。OD260/OD280值约为1.7-1.9,说明DNA纯度较好;若小于1.7有可能有蛋白污染;若大于2.0,说明有RNA污染或DNA已经降解。
价格.实验周期
服务项目
样品要求
收费标准
实验周期
细胞基因组DNA提取
细胞用量:1x10(4次方)—1x10(6次方)个,新鲜培养(1-2天)
80元/样品
3个工作日
组织基因组DNA提取
组织用量:25mg,新鲜标本或液氮冻存的标本
80元/样品
3个工作日
血液基因组DNA提取
血液用量:5ml,新鲜或液氮冻存的标本
100元/样品
5个工作日
菌液基因组DNA提取
对数生长期的新鲜菌液1~2ml
80元/样品
3个工作日
*以上实验周期是针对正常实验样品制定的,样品特殊或样品多时除外。
提供结果
包括基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳图、OD值测定结果、基因组DNA的浓度及总含量。