用兔抗人IgG4 的多克隆抗体( IgG4Ab) 包被成固相板,以识别结合待测标本中的IgG4 。用生物素标记 IgG4Ab 得Bio2IgG4Ab ;用亲和素标记辣根酶得HRP2A。在已包被IgG4Ab 的固相板中加入IgG4 标准品(或待 测样品) ,反应、洗涤后,加入Bio2IgG4Ab ,反应、洗涤后,加入HRP2A ,反应、洗涤后,板上形成IgG4Ab —IgG4 —
Bio2IgG4Ab —HRP2A 复合物,加酶底物显色,用酶标仪在490 nm 波长测定OD 值,作标准曲线,根据标准曲线, 查出标本中IgG4 含量。该法测定范围:2. 5～200ng/ mL ,最低检出量2. 1ng/ mL ,批内和批间CV 分别8. 4 % 和 11. 2 %。测得血清IgG4 含量:青年人(30 名) 为37. 7 ±2. 3ng / mL ;30 名献血员为42. 7 ±9. 9ng/ mL , 49 例重
症监护患者明显升高为71. 2 ±9. 2ng/ mL ; 49 例肺部感染患者明显降低为28. 4 ±9. 2 ng/ mL 。结果表明该法稳 定,灵敏度适于检出人血清IgG4 水平。