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武汉云克隆诊断试剂研究所
慢性胰腺炎(CP)大鼠模型

慢性胰腺炎(CP)大鼠模型

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产品名称: 慢性胰腺炎(CP)大鼠模型

英文名称: Rat Model for Chronic Pancreatitis (CP)

产品编号: DSI754Ra01

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武汉云克隆诊断试剂研究所
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来源
二丁基二氯化物(DBTC)致慢性胰腺炎
模式动物品系
SPF级SD大鼠,健康,3-4W,雄性,体重为180g-200g。
实验分组
实验分六组:正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
实验周期
4-6 weeks
建模方法
SD大鼠随机分为3组。3组分别为建模4周,6周,8周。实验前12h禁食,不禁水。
DBTC先溶于100%酒精,然后再与甘油混合(三者的比例为1:2:3),将大鼠放入固定器中,经尾静脉注入以上DBTC溶液200ul(DBTC 8mg/kg 体重)。可导致不同时间点的大鼠慢性胰腺炎。

采用通过大鼠静脉、腹腔或胰胆管内注射化学试剂的方法。但受所用大鼠种类、化学药物的因素影响,通常所复制的慢性胰腺炎动物模型是有差异的,导致形成慢性胰腺炎的机制也有很大区别。诸如食物诱导法所用的WBN/Kob大鼠本身有TGF-β的高表达,富含蛋白质、脂肪的特殊饲料能进一步促进胰腺纤维化;静脉注射DBTC可能通过药物引起大鼠胆管上皮细胞损伤,坏死的上皮细胞聚集造成胰胆管的阻塞,先出现急性间质性胰腺炎,以后成为慢性病程,最后形成纤维化;而腹腔内注射雨蛙肽和TGF-β则是在雨蛙肽反复引起急性水肿型胰腺炎的基础上,TGF-β加重了胰腺炎的纤维化进程;腹腔内注射二乙基二硫代氨基甲酸钠(Diethy Mithiocarbamate, DDC)和超氧化物歧化酶(SOD)产生抑制,通过反复的氧化刺激胰腺,在2~3周内导致胰腺产生纤维化;胰胆管内注射三硝基苯磺酸(Trinitrobenenze sulfonic acid, TNBS)激活胰腺星状细胞引起了胰腺的纤维化。
应用
疾病模型
模型评价
监测大鼠进食量、体质量:
大鼠一般情况:记录大鼠平均食物摄人量、体质量。与空白对照组比较,模型组大鼠精神萎靡,毛发光泽度差,进食减少,排便次数多,大便稀烂。

组织病理学
胰腺病理观察
常规切片,HE染色。参考Matsumura等评分系统进行评分。
胰腺病理变化:模型组第1天可见胰腺略有肿胀,第3天肿胀充血明显,胰管稍有扩张,可见囊肿初步形成,第7天囊肿逐渐增大,胰腺与周围组织有粘连。第14天可见有部分巨大囊肿形成,胰腺开始萎缩并有结节形成。第28天时胰腺萎缩、颜色变白、结节较前更加明显,部分胰腺囊肿合并感染。
镜下见模型组大鼠第1天胰腺水肿、间质增宽、大量炎性细胞浸润,部分腺泡坏死,第3天见腺泡萎缩,有成纤维细胞增生,腺泡细胞周纤维组织形成,炎性细胞浸润,第7天腺泡周围有纤维化。第14天除炎性细胞浸润及腺泡周围纤维化,可见小叶间及导管周围纤维化,第28天胰腺明显纤维化。

标志因子水平
淀粉酶、蛋白质及羟脯氨酸含量的测定
胰腺淀粉酶、蛋白含量、羟脯氨酸表达测定:采用碱水解法检测胰腺羟脯氨酸含量。BCA法检测胰腺蛋白质含量。
ELISA方法检测胰腺淀粉酶含量。
胰腺组织蛋白、淀粉酶、羟脯氨酸表达含量变化:模型组大鼠胰腺蛋白质、淀粉酶含量逐渐降低,羟脯氨酸含量逐渐升高

统计学分析
应用SPSS软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x ±s)表示,采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示有显