一、一级结构解析的主要技术原理 二、蛋白质一级结构解析的标准流程 三、蛋白一级结构分析的应用价值引言：蛋白质结构研究的起点

蛋白质的一级结构是指其氨基酸的线性排列顺序，决定了其后续空间结构（如二级、三级、四级结构）及生物功能。一级结构不仅体现了蛋白质的遗传信息表达结果，也奠定了蛋白质功能实现的基础。

准确解析蛋白质的一级结构，对于研究蛋白功能机制、识别突变位点、开发治疗性抗体与疫苗具有重要意义。目前，蛋白质一级结构的解析主要依赖于两种核心技术：Edman降解法和质谱法（Mass Spectrometry）。

1、Edman降解：经典的化学测序方法

Edman降解通过从蛋白质N末端逐一切除氨基酸并进行鉴定，可实现短肽段的精确测序。其优点是特异性强、结果明确，但存在以下局限：

（1）仅适用于20~50个氨基酸以内的短肽

（2）对N末端封闭或修饰的蛋白无法测序

（3）通量较低，难以应对复杂样本

2、质谱测序：高通量主流方案

当前蛋白质一级结构解析的主流技术为液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）。其原理如下：

（1）蛋白质经胰蛋白酶等酶切成多肽段

（2）多肽段经LC分离后进入质谱仪

（3）MS1获取母离子质量，MS2进行碎裂模式分析

（4）通过软件比对碎片离子图谱，推断氨基酸序列

质谱测序具备以下优势：

• 适用于复杂样本和大分子蛋白
• 可同时解析多个蛋白、多个修饰位点
• 与数据库比对结合，覆盖面广、效率高

步骤1：蛋白提取与定量

提取细胞、组织或血清中的蛋白质样本，标准化浓度。

步骤2：还原、烷基化与酶切

通过还原剂（DTT）和烷基化剂（IAA）处理后进行胰蛋白酶酶解，获得可上机分析的多肽段。

步骤3：LC-MS/MS测序

多肽段通过液相色谱进入质谱仪进行MS/MS测定，记录肽段碎裂信息。

步骤4：数据分析与序列鉴定

使用MaxQuant、PEAKS、Byonic等工具进行序列重建、突变位点比对和翻译后修饰识别。

1、新蛋白鉴定与功能预测

一级结构为新发现蛋白提供分子基础，可用于结构建模和功能注释。

2、疾病相关突变检测

通过比较病理样本与对照样本的一级结构差异，可识别点突变、剪接变体等致病因素。

3、生物制药产品质量控制

抗体、重组蛋白等生物药中，一级结构测序用于验证表达正确性与纯度一致性。

4、翻译后修饰（PTMs）定位

质谱测序可同时解析磷酸化、乙酰化等修饰位点，辅助研究蛋白调控机制。

百泰派克生物科技一级结构解析服务

百泰派克生物科技为科研与生物制药客户提供覆盖广泛的蛋白质一级结构解析服务，包括：

• Edman与质谱双平台支持，满足不同样本类型与目标需求
• 标准化的酶解与纯化流程，提升结果一致性
• 先进质谱设备（Orbitrap Exploris、Fusion Lumos）实现高精度测序
• 数据解读+报告输出，支持FASTA格式导出、突变/修饰标注
• 支持与二级结构预测、功能注释、生信分析联动

蛋白质一级结构是其功能实现的起点，精确解析其氨基酸序列，是理解生命活动本质的重要一步。借助高分辨质谱等技术平台，一级结构测序正变得更快、更准、更广。百泰派克生物科技致力于为客户提供专业、可靠的蛋白结构解析服务。如您有蛋白测序、结构验证或功能研究需求，欢迎联系我们获取个性化解决方案。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

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6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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