MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，化学名称： 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。

操作步骤

1.收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度1000- 10000 /孔。

2.一定条件培养细胞适当时间，至细胞单层铺满96孔平底板,加入浓度梯度的药物。

3.适当条件培养适当时间，倒置显微镜下观察。

4.每孔加入10ul MTT溶液，继续培养1-4h。若药物与MTT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲2-3遍后，再加入含MTT的培养液。

5.终止培养，小心吸去孔内培养液。

6.每孔加入100ul二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值。

活力计算：

细胞活力（％）=[A(加药)-A（空白）]/[A（0加药）-A（空白）]×100

A（加药）：具有细胞、MTT溶液和药物溶液的孔的吸光度

A（空白）：具有培养基和MTT溶液而没有细胞的孔的吸光度

A（0加药）：具有细胞、MTT溶液而没有药物溶液的孔的吸光度

细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力

应用范围

1.抗肿瘤药物筛选

2.细胞毒性试验

3.肿瘤放射敏感性测定

服务期限

1-2周。