检测: | 蛋白定量检测、同种分型检测、免疫检测 |
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描述: | Easy-Titer 小鼠 IgG 检测试剂盒 |
产品线: | Easy-Titer™ |
检测方法: | 比色法 |
适用于(设备): | 分光光度计、酶标仪 |
靶标特异性: | 靶标特异性 |
技术: | 基于溶液的检测、吸光度 |
足够用于:总共 96 次检测(包括每次使用 9 份标准品)
• 山羊抗小鼠 IgG 敏化珠,2 mL
• Easy-Titer 稀释缓冲液,30 mL
• Easy-Titer 封闭缓冲液,15 mL
储存在 4°C 下(切勿冷冻)。
描述
Scientific Easy-Titer 小鼠 IgG 检测试剂盒包括抗体敏化的微球,用于使用标准微孔板和 UV-Vis 酶标仪(分光光度计)通过简单快速的微凝集技术测量抗体的特定浓度。该试剂盒对小鼠 IgG 具有特异性,且与总蛋白检测不同,它可特异性测量含有其他蛋白的样品(如血清、血浆、培养物上清液)中的靶抗体浓度。该试剂盒灵敏,只需极少样品量。根据检测响应(吸光度),通过与使用已知抗体样品(单独出售)稀释液制备的标准曲线进行比较,确定抗体浓度。
Easy-Titer 抗体检测试剂盒的一般特点:
•基于抗体的特异性—测量样品中靶抗体(而不仅仅是总蛋白)的浓度;无需纯化抗体即可评估浓度
• 与 ELISA 相比更快且更简单—三组分均相检测;总孵育时间仅需 10 分钟
• 无需特殊设备—使用标准涡旋混合器、移液器、96 孔微孔板、板振荡器和读数器(测量 340 nm 或 400 nm 处的吸光度)
• 灵敏—测定范围(标准曲线)8 至 500 ng/mL;使用 15 至 300 ng/mL 的样品可获得最佳结果
• 可重现—变异系数 < 5%;误差取决于稀释和移液技术
• 抗体标准品(单独销售)—关于推荐的产品,请参见产品列表;使用任何具有正确靶标同一性和已知浓度(大于 10 µg/mL)的抗体标准品
• 适用于 5 种常用靶标的试剂盒—选择适用于特定物种和免疫球蛋白类别的特异性试剂盒;与其他物种和类别的靶抗体类别不发生交叉反应
Easy-Titer 检测试剂盒根据使用特异性抗 IgG 或 IgM 多克隆抗体包被(“敏化”)的微球的凝集反应,检测和测量特异性靶抗体。在适当的水性缓冲液(试剂盒中提供)中,单分散抗体包被微球(> 1 µM 直径)对波长 (340 nm) 约为直径一半的入射光具有最高吸收率 (λ-max)。加入样品时,两个或多个微球通过其包被的特异性多克隆抗体与各抗体靶标结合,且这种凝集反应有效地形成更大的表观微球,导致吸收率成比例降低(吸光度降低)。
典型的微凝集试验依赖于光散射的变化和透射率的相应变化(吸收率与吸光度呈负相关)。Easy-Titer 检测试剂盒采用特殊的稀释缓冲液,其折射系数可消除单分散性微球上光散射对测定用波长的影响。因此,必须使用试剂盒中提供的稀释缓冲液对试验中使用的样品进行最终 10 至 20 倍稀释。
Easy-Titer 抗体检测与 ELISA 相比更快且更简单:
• 通过在试剂盒稀释缓冲液中稀释纯化抗体,制备标准品(5 至 500 ng/mL)。
•通过在稀释缓冲液中稀释至测定范围(8 至 500 ng/mL)内,制备样品。
•装有微球珠的涡旋样品瓶以形成均相悬浮液。
•用移液器将 20 µL 微珠悬浮液和 20 µL 各样品和标准品移入 96 孔微孔板孔中。
•在充分混合下对微孔板进行 5 分钟孵育。
•添加 100 µL 试剂盒封闭试剂。
•在充分混合下对微孔板进行 5 分钟孵育。
•在标准酶标仪上测量吸光度(340 nm 或 405 nm)。
•绘制标准曲线,用插值法确定样品浓度。
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