13.在实验中OD值太高,怎么解决?
答:可以缩短加入CCK-8后的培养时间。例如:可以把加入CCK-8试剂后的培养时间由2小时缩短为1小时。此外,可适当减少细胞的数量。
14.如果OD值太低,怎么解决?
答:可以采取2个办法:1、适当增加细胞数量 2、延长加入CCK-8试剂后的反应时间。
15.应该每次做标准曲线吗?
答:建议每次做。虽然细胞是一样的,但是细胞的状态不一定一样。对于状态不一样的细胞,建议每次做标准曲线。
16.在cck-8显色过程中,如何终止反应
答:有以下几种方法(96孔板):
(1) 在显色反应后,将培养板放置4°冰箱内;
(2) 每孔加入10ul 0.1M HCL溶液。
(3) 每孔加入10ul 1%(w/v)的SDS溶液。注:反应停止后,应在24h内测定
17.如何减少由于CCK-8试剂在孔壁上的残留所带来的误差
答:可以在加样前用培养基稀释CCK-8试剂并混匀后加样
18.好用的 CCK-8 试剂盒推荐?
答:百萤生物生产的 Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞活力检测试剂盒已广泛用于生物活性因子的活性检测,抗肿瘤药物的筛选,细胞增殖的测定,细胞毒性检测以及药敏等与细胞活性和增殖相关的实验
19.如何使用CCK-8进行细胞增殖实验?
答:通常,使用CCK-8进行细胞增殖实验的步骤如下:
(1)将需要测定增殖能力的细胞均匀悬浮在培养基中,并将其分配到孔板或培养皿中。
(2)在每个孔中加入CCK-8试剂,并确保试剂均匀分布。
(3)将孔板或培养皿放回培养箱中,进行一定时间的培养,使细胞与试剂发生反应。
(4)反应结束后,使用吸光度计测量吸光度,并根据标准曲线或控制组进行数据分析,得出细胞增殖能力的相对值。
20.CCK-8试剂盒的优点是什么?
答:(1)高灵敏度:CCK-8试剂可以对低细胞数进行检测,因此对于罕见细胞或稀释的细胞样品非常有用。
(2)快速操作:CCK-8试剂盒提供了一种快速而简便的方法来评估细胞的增殖情况,通常只需几个小时即可得到结果。
(3)可行性高:CCK-8试剂盒对各种细胞类型都具有较好的适用性,可应用于多种细胞培养条件和实验设计。
21.有没有CCK-8及与其他细胞增殖检测试剂的特性对比?
答:图中提供了多种用于检测细胞增殖的方法、对比,供参考
22.CCK-8试剂盒是否有副作用?
答:CCK-8试剂盒是一种常用的细胞增殖检测试剂,通常在细胞培养实验中使用,并且已被广泛验证和接受。一般情况下,正确使用CCK-8试剂盒不会对细胞产生明显的副作用。CCK-8试剂本身对细胞具有较低的毒性。它是一种水溶性试剂,主要由WST-8(水溶性四氧化三氮唑盐)和电子媒介体1-Methoxy PMS(促进电子传递)组成。
在CCK-8试剂中,WST-8可被细胞内的代谢活性还原为橙色的水溶性产物,该产物在细胞外可通过光学密度测量进行定量检测。1-Methoxy PMS作为电子媒介体,促进WST-8的还原反应。
当CCK-8试剂与细胞接触时,其影响对细胞的影响主要来自WST-8的还原产物。在适当的浓度下,CCK-8试剂对细胞的生长和代谢活性影响较小,并不会对细胞造成明显的毒性。
然而,值得注意的是,对于特定的细胞类型或实验条件,可能需要根据实际情况进行优化和验证。此外,在使用CCK-8试剂时,建议遵循相关的操作规程和安全指南,确保安全操作和正确解读实验结果。
23.CCK-8在实验时,每孔应该接种多少细胞?
答:针对标准96孔板,贴壁细胞的最小接种量为1000个/孔 (100μl培养基)。若为白细胞,接种量不低于2500个/孔 (100μl培养基)。如若使用24孔板或6孔板,应预先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。
以上是百萤整理的CCK-8试剂盒的问题以及解答,大家可以做为参考